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進(jìn)口液相色譜儀的使用步驟
點(diǎn)擊次數(shù):1601 更新時(shí)間:2014-06-30 打印本頁(yè)面 返回
進(jìn)口液相色譜儀的使用步驟
  進(jìn)口液相色譜儀它包括空柱和填料??罩莾?nèi)壁拋光的不銹鋼管,內(nèi)徑為4~5mm,長(zhǎng)100~250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈,用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中,用柱式機(jī)械往復(fù)泵輸入新鮮脫氣的流動(dòng)相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液,用正己烷(含 0.05%甲醇)或甲醇:水(83:17)為流動(dòng)相測(cè)定柱效及分離度塔板數(shù)在2~3萬(wàn)/ml以上及分離度在1.5以上者,柱效好。為防止柱污染,常用1個(gè) 50mm長(zhǎng),4~5mm內(nèi)徑,裝有硅膠(40-50mm)或立柱相同填料的保護(hù)柱(預(yù)柱)接在主柱之前,以延長(zhǎng)色譜柱的壽命。反相鍵合相柱用畢。必須用水充分流經(jīng),以洗去鹽類(lèi)、酸堿等雜質(zhì)防止柱生銹及填料中雜質(zhì)的積聚,再用甲醇流經(jīng)洗滌使色譜柱獲得再生。
 
  流動(dòng)相的洗脫方式配好經(jīng)脫氣的流動(dòng)相放于貯液瓶中,經(jīng)過(guò)有濾過(guò)頭、內(nèi)徑2mm的聚四氟乙烯管流入高壓泵進(jìn)入色譜柱,zui后自檢測(cè)器流出或收集或作廢液回收。用流動(dòng)相洗脫的方式有恒溶劑脫洗法(isocratic dlution),即自洗脫開(kāi)始到結(jié)束,溶劑的配比恒定。另一類(lèi)為梯度洗脫法(gradicnt clution),即使溶劑的極性強(qiáng)度在色譜過(guò)程中逐漸增加。須按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比,從而使同一個(gè)試樣中組分性質(zhì)相差較小的及較大的都能在一次色譜過(guò)程中很好分離,而整個(gè)色譜過(guò)程縮短。必須注意,梯度洗脫法不能用于分子排阻色譜及用電化學(xué)檢測(cè)的反相液相色譜法中。
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